BioGems無血清細胞培養(yǎng)添加物—轉鐵蛋白和胰島素
白蛋白、胰島素和轉鐵蛋白等是無血清培養(yǎng)體系中細胞生長所必須的因子。
Biogems的人重組轉鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同,批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細胞重組表達,不含動物成分。質控嚴格,zui大程度地降低了污染的風險。
訂購信息
品牌 | 貨號 | 產品描述 | 來源 | 規(guī)格 | 價格 |
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選購背景
一 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)中的作用
二 重組和提取的胰島素和轉鐵蛋白的區(qū)別
三 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度
一 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)中的作用
胰島素在無血清培養(yǎng)基中的作用
無血清或低血清培養(yǎng)基中,胰島素為必加組分,這是由胰島素對細胞的重要作用決定的。
我們都知道,胰島素在體內zui主要的功能是調節(jié)機體血糖水平。其實胰島素的作用非常
廣泛,包括調節(jié)蛋白質和脂肪的代謝,以及促進細胞生長等。
轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的作用
轉鐵蛋白是通用的鐵轉運劑,其可通過幫助細胞調節(jié)對鐵的攝取量而維持細胞的穩(wěn)態(tài),
進而有利于細胞的生長和增殖。
牛血清中含有牛種屬的轉鐵蛋白,由于轉鐵蛋白的保守性,牛轉鐵蛋白可對人和動物
細胞起到很好地保護和支持作用,因此培養(yǎng)基中通常要加入牛血清從而組成*培養(yǎng)基。無
血清培養(yǎng)基為達到與含血清培養(yǎng)基相同或相似的細胞培養(yǎng)性能,其中也必須添加轉鐵蛋白,
以實現(xiàn)對細胞鐵離子平衡的調節(jié),以及對細胞生長和增殖的維持。
二 無血清培養(yǎng)基中應該添加提取的胰島素和轉鐵蛋白,還是重組的胰島素和轉鐵蛋白?
人胰島素的來源有限,無法滿足臨床和科研的需求,因此人們通常從牛或豬的胰臟中提取獲得胰島素。
人血漿中轉鐵蛋白的含量豐富,約為 25mg/ml,占血漿總蛋白的 4%,而且轉鐵蛋白的種屬間交叉活性比較強,所以轉鐵蛋白多從人或牛的血漿中提取而得。
胰島素種屬間高度保守,豬和牛的胰島素與人的胰島素氨基酸序列上分別僅有 1 個和 3
個氨基酸的差異,所以豬和牛的胰島素*可以替代人的胰島素來進行科學實驗和臨床治療。然而,畢竟豬和牛的胰島素屬異種蛋白,進入人體后容易產生抗體,影響治療效果,并引起副反應。所以,目前臨床上廣泛應用的是重組人胰島素,即使用基因工程手段,將人的胰島素基因轉移到細菌或者酵母細胞中,然后利用發(fā)酵工藝,進行大規(guī)模的生產,從而得到大量、高純度的人胰島素。
同樣的,提取的轉鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉鐵蛋白添加于用于細胞治療的無血清培養(yǎng)基中時,可能會將人或動物的病原體(如瘋牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細胞而帶入人體,從而發(fā)生非預期的疾病。而重組的轉鐵蛋白,則可*避免人或動物病原體污染的可能性,因此更適合用于配制細胞治療用的無血清培養(yǎng)基。
三 胰島素和轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度
胰島素
所培養(yǎng)的細胞不同,無血清培養(yǎng)基中所需的胰島素量也有所區(qū)別,一般在 1-10mg/L之間。
轉鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度
轉鐵蛋白
同樣的,細胞種類不同,對轉鐵蛋白的需求量也不同,下表謹供參考。具體的濃度還是要根據細胞的種類、狀態(tài)和想要實現(xiàn)的功能來通過實驗確定。
表 4:轉鐵蛋白在無血清細胞培養(yǎng)基中的添加濃度
| 原代細胞 | CHO(中國倉鼠卵巢細胞) | 雜交瘤和 Vero 細胞 |
轉鐵蛋白工作濃度 | 5 -100mg/L | 10 - 50mg/L | 5mg - 20mg/L |
資料來源:BioGems
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