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首頁 > 技術(shù)支持 > CAR-T 細(xì)胞治療:負(fù)選EasySep Enrichment Kit

技術(shù)支持

CAR-T 細(xì)胞治療:負(fù)選EasySep Enrichment Kit
更新時(shí)間:2018-01-18   點(diǎn)擊次數(shù):4781次

CAR-T 治療:T細(xì)胞分選EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit

 

免疫細(xì)胞治療

    人免疫系統(tǒng)(immune system)是防衛(wèi)病原體入侵zui有效的武器,具有以下功能:

免疫防御:識(shí)別和清除外來入侵的抗原,如病原微生物等。

免疫監(jiān)視:識(shí)別和清除體內(nèi)發(fā)生突變的腫瘤細(xì)胞或其他有害的成分。

免疫自穩(wěn):識(shí)別和清除體內(nèi)變性、衰老、死亡的細(xì)胞,維持體內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定。

 

免疫細(xì)胞治療是一種將患者自體的免疫細(xì)胞在體外培養(yǎng)、活化、擴(kuò)增,再回輸入患者體內(nèi),利用患者自身免疫細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞進(jìn)行治療的生物治療技術(shù)。

 

免疫細(xì)胞治療惡性腫瘤一直是醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn),相對(duì)于傳統(tǒng)腫瘤治療(手術(shù)、化療、放療),優(yōu)勢(shì)已經(jīng)越來越明顯,在一些腫瘤疾病類型上,甚至已經(jīng)取代傳統(tǒng)的治療手段,成為一線治療方法,比如這幾年的研究大熱點(diǎn)CAR-T治療,在治療血液性腫瘤上面取得了突破性的成績,國內(nèi)外制藥大公司注冊(cè)的CAR-T臨床試驗(yàn)高達(dá)百個(gè)。

    

免疫細(xì)胞

                 

 CAR-T細(xì)胞               NK細(xì)胞      CIK細(xì)胞                       

 

CAR-T免疫細(xì)胞治療模式

 

 

CAR-T免疫細(xì)胞療法流程的相關(guān)階段

病人來源的T細(xì)胞樣本(PBMC等)——T細(xì)胞分離分選——CAR-T細(xì)胞活化、擴(kuò)增,基因工程改造——CAR-T細(xì)胞回輸

 

CAR-T是一種通過基因工程改造T細(xì)胞對(duì)白血病的血液腫瘤細(xì)胞進(jìn)行攻擊的免疫療法。截止去年十月,已有諾華和Kite兩家公司獲得FDA認(rèn)證的唯二基因療法。CAR-T免疫細(xì)胞療法大熱中。這兩個(gè)臨床成功的CAR-T療法都對(duì)來自病人的外周血進(jìn)行磁珠分選篩選T細(xì)胞。Stemcell的EasySep™T細(xì)胞富集分選試劑盒可以用于CAR-T療法的T細(xì)胞分選階段(免疫磁珠細(xì)胞分選法)。EasySep™T細(xì)胞富集分選試劑盒磁珠分選采用負(fù)選方式,可以避免標(biāo)記T細(xì)胞,以防標(biāo)記抗體對(duì)T細(xì)胞造成傷害,zui大程度保持T細(xì)胞的untouched活性,立即用于下游CAR-T研究。

T細(xì)胞負(fù)選方案介紹

在負(fù)選時(shí),非目標(biāo)細(xì)胞通過針對(duì)細(xì)胞表面抗原的抗體被去除。負(fù)選試劑中的抗體組合確定哪些細(xì)胞被去除。

以下情況,比較適合負(fù)選:

需要未經(jīng)標(biāo)記的細(xì)胞

若將抗體結(jié)合到目標(biāo)細(xì)胞上會(huì)造成抑制或活化,影響下游研究

目標(biāo)細(xì)胞沒有特異性抗體可用來標(biāo)記

需要去除某些類型的細(xì)胞

 

EasySep™T細(xì)胞富集試劑盒

EasySep™T細(xì)胞富集試劑盒可用于從新鮮或凍存外周血單個(gè)核細(xì)胞中通過負(fù)選方式分離T細(xì)胞。不需要的細(xì)胞被識(shí)別非T細(xì)胞的四聚體抗體復(fù)合物(Tetrameric Antibody Complexes)和dextran包被的磁珠標(biāo)記后移除。被標(biāo)記細(xì)胞不需要過柱,使用EasySep™磁極就能簡單分離。需要的細(xì)胞被倒到新管子。分離細(xì)胞可以立即用于下游:流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)(CAR-T免疫療法)或DNA/RNA提取。

推薦使用新版EasySep™T細(xì)胞分選試劑盒貨號(hào):17951),短至8分鐘即可完成免疫磁珠細(xì)胞分選

EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit targets non-T cells for removal with antibodies recognizing specific cell surface markers. Unwanted cells are labeled with antibodies and magnetic particles, and separated without columns using an EasySep™ magnet. Desired cells are simply poured off into a new tube. Isolated cells are immediay available for downstream applications such as flow cytometry, culture, or DNA/RNA extraction. 

 

基本信息

中文名稱 EasySep™T細(xì)胞富集試劑盒

英文名稱 EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit

 

用于標(biāo)記1 x 109個(gè)細(xì)胞

EasySep™T細(xì)胞富集試劑盒是套裝,包含:

EasySep™ Human T Cell Enrichment Cocktail(1mL) T細(xì)胞富集抗體復(fù)合物

EasySep™ D Magnetic Particles(1mL) 磁珠

貨號(hào):19051

保存 2 - 8°C,不能冷凍。

 

EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit適用樣本

EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit可用于從各種樣本來源中分選高純度的人T細(xì)胞,包括:新鮮或凍存外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)、白細(xì)胞單采術(shù)(Leuko Pak)樣本。目標(biāo)細(xì)胞被抗體復(fù)合物和磁珠標(biāo)記,以進(jìn)行負(fù)選。

 

 

CAR-T免疫細(xì)胞療法相關(guān)產(chǎn)品

 

淋巴細(xì)胞分離液

GE Ficoll Paque淋巴細(xì)胞分離液是一種無菌、即用型的淋巴細(xì)胞分離液,根據(jù)外周血中各類細(xì)胞在密度梯度離心中呈現(xiàn)不同的密度梯度分布而將全血中的淋巴細(xì)胞等單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行分離。適用人外周血、骨髓和臍帶血的單個(gè)核細(xì)胞分離。Ficoll Paque PREMIUM經(jīng)GMP認(rèn)證,適合臨床使用。

GE

17-1440-02

Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細(xì)胞分離液

6×100 ml

GE

17-1440-03

Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細(xì)胞分離液

6×100 ml

GE

17-5442-02

Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴細(xì)胞分離液

6×100 ml

GE

17-5442-03

Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴細(xì)胞分離液

6×100 ml

 

免疫磁珠分選

Stemcell免疫磁珠分選

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

Stemcell

19051

EasySep Human T Cell Enrichment Kit

EasySep™T細(xì)胞富集試劑盒

Stemcell

17951

EasySep™Human T Cell Isolation Kit,EasySep™人T細(xì)胞富集試劑盒的新版

Stemcell

17851

EasySep™ Human CD3 Positive Selection Kit II,T細(xì)胞正選

Stemcell

18000

EasySep™磁極

Stemcell

20144

EasySep™Buffer

 

Miltenyi免疫磁珠分選

臨床級(jí)CART制備方案

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

Miltenyi

200-070-132

CliniMACS CD4 Reagent CE

Miltenyi

200-070-115

CliniMACS D8 Reagent

Miltenyi

200-070-119

CliniMACS CD62L Reagent CE

Miltenyi

200-070-131

CliniMACS CD25 Reagent, CE

Miltenyi

200-070-146

CliniMACS CD45RA Reagent

Miltenyi

200-070-117

CliniMACS CD19 Reagent, CE

Miltenyi

200-070-118

CliniMACS CD14 Reagent, CE

Miltenyi

200-073-104

CliniMACS Tubing Set, CE

Miltenyi

130-097-184

CliniMACS Prodigy TS 510 for Research Use

 

T細(xì)胞級(jí)亞群的分選

Miltenyi

130-091-114

CD2 MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-050-101

CD3 MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-098-193

MACSxpress Pan T Cell Isolation Kit

1 kit

Miltenyi

130-096-535

Pan T Cell Isolation Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-091-264

CD6 MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-093-247

CD28 MicroBead Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-097-095

Naive Pan T Cell Isolation Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-045-101

CD4 MicroBeads

2 mL

Miltenyi

130-055-101

CD4 Multisort Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-096-533

CD4+T Cell Isolation Kit

1 kit

Miltenyi

130-045-201

CD8 MicroBeads

2 mL

Miltenyi

130-055-201

CD8 Multisort Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-096-495

CD8+ T Cell Isolation Kit去除分選,untouched細(xì)胞

1 kit

Miltenyi

130-094-131

Naive CD4+ T Cell Iso Kit II, human

1 kit

Miltenyi

130-091-758

CD62L MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-045-901

CD45RA MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-046-001

CD45RO MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-094-302

CD4+ Central Mem T Cell Isoaltion Kit,human

1 kit

Miltenyi

130-093-244

Naive CD8+ T Cell Iso Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-045-901

CD45RA MicroBeads

2 mL

Miltenyi

130-046-001

CD45RO MicroBeads, human

2 mL

Miltenyi

130-094-412

CD8+ Memory T Cell Isolation Kit, human

1 kit

Miltenyi

130-042-301

MidiMACS™ Starting Kits,LS

1 kit

Miltenyi

130-090-329

MidiMACS™ Starting Kits,LD

1 kit

Miltenyi

130-091-758

CD62L MicroBeads

2 mL

Miltenyi

130-091-221

autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer

6×1.5 L

Miltenyi

130-091-222

autoMACS® Rinsing solution

6×1.45 L

Miltenyi

130-091-376

autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer

6×75 mL

 

 

激活:CAR-T細(xì)胞 CIK細(xì)胞

T細(xì)胞活化抗人CD3單克隆抗體(Functional,clone: OKT3)可以與TCR復(fù)合物結(jié)合,激活T細(xì)胞。SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins) 類產(chǎn)品是BioGems品牌下的功能性抗體產(chǎn)品。

Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 用于活化和擴(kuò)增人 T 細(xì)胞和 T 細(xì)胞克隆,以作研究之用。Dynabeads® CD3/CD28 T Cell Expander 提供了活化和擴(kuò)增 T 細(xì)胞的簡單方法,無需抗原呈遞細(xì)胞或抗原。 Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 是均勻的 4.5 µm 超順磁珠,與抗 CD3 和抗 CD28 單克隆抗體的優(yōu)化混合物偶聯(lián)。通過使抗 CD3 和抗 CD28 抗體與 Dynabeads® 結(jié)合,這種微珠可以提供 T 細(xì)胞活化和擴(kuò)增所需的原始和共刺激信號(hào)。

RetroNectin®重組人纖維蛋白片段CD3單克隆抗體(OKT3)兩者共同作用可以刺激T細(xì)胞的增殖和分化

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

PeproTech/BioGems

05121-25-500

Anti-Human CD3 mAb (克隆號(hào)OKT3)

500μg

PeproTech/BioGems

10311-25-500

Anti-Human CD28 mAb(克隆號(hào)CD28.2)

500μg

GIBCO

11131D

Dynabeads™ Human T-Activator CD3/CD28 磁珠

2 mL

StemCell

10971

ImmunoCult™ Human CD3/CD28 T Cell Activator

2 mL

StemCell

10970

ImmunoCult™ Human CD3/CD28/CD2 T Cell Activator

2 mL

PeproTech

AF-200-02

重組人IL-2 (Animal Free)

50ug/

100ug

PeproTech

AF-300-02

重組人IFN-γ(Animal Free)

100ug

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

TAKARA

T100B

RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment

重組人纖維蛋白片段

2.5mg

TAKARA

T100A

0.5mg

TAKARA

T201

RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment

重組人纖維蛋白片段,GMP級(jí)

2.5 mg 凍干粉

 

擴(kuò)增:免疫細(xì)胞培養(yǎng)基

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

Corning

88-581-CM

KBM581, serum-free medium for DC and CIK

DC/CIK 細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

1 L/瓶

StemCell

10981

ImmunoCult™-XF T Cell Expansion Medium

無血清T細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基

500mL/瓶

TAKARA

GT-T551 H3

淋巴細(xì)胞、DC細(xì)胞、NK細(xì)無血清胞培養(yǎng)基

1000 ml

 

檢測(cè)

細(xì)胞增殖檢測(cè)

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

PeproTech/BioGems

63310-00-500

 CFSE

  500 mg

 

細(xì)胞凋亡檢測(cè)

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

PeproTech/BioGems

60910-00

Propidim Iodide Solution

200 tests

500 tests

PeproTech/BioGems

61410-00

7-AAD Solution

200 tests

500 tests

 

 

慢病毒檢測(cè)

TAKARA

632200

Lenti-X p24 Rapid Titer Kit慢病毒滴度測(cè)定 p24 ELISA 試劑盒

1 kit

Gibco

11913-019

CD 293 無蛋白培養(yǎng)基

1000 mL

 

 

CAR-T凍存

GMP級(jí)BioLife Solutions細(xì)胞凍存液

BioLife Solutions

210102

CryoStor CS10 Freeze Media 細(xì)胞DMSO凍存液

 

100 mL/瓶

BioLife Solutions

202102

CryoStor CS2 Freeze Media 細(xì)胞DMSO凍存液

 

100 mL/瓶

BioLife Solutions

205102

CryoStor CS5 Freeze Media 細(xì)胞DMSO凍存液

 

100 mL/瓶

 

細(xì)胞凍存袋

OriGen CryoStore 細(xì)胞凍存袋

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

OriGen

CS25N

CryoStore 25 EVA 凍存袋,N型管路

24個(gè)/箱

OriGen

CS50

CryoStore 50 EVA 凍存袋

24個(gè)/箱

OriGen

CS250

CryoStore 250 EVA 凍存袋

24個(gè)/箱

OriGen

CS250N

CryoStore 250 EVA 凍存袋,N型管路

24個(gè)/箱

 

 

EasySep Human T Cell Enrichment Kit 訂購信息

 

 

細(xì)胞類型

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

純度

適用的染色抗體

T細(xì)胞

17951

17951RF

EasySep Human T Cell Isolation Kit

EasySep™T細(xì)胞分選試劑盒

96.7 ± 1.5%

CD2(貨號(hào)#60007)

CD3(貨號(hào)#60011)

CD4(貨號(hào)#60016)

CD8a(貨號(hào)#60022)

CD45(貨號(hào)#60018)

19051

19051RF

EasySep Human T Cell Enrichment Kit

EasySep™T細(xì)胞富集試劑盒

95.0 - 99.0%

 

說明:RF:貨號(hào)后加RF,比如17951RF,代表RoboSep™試劑盒包含EasySep™分選試劑盒、RoboSep™緩沖液和1-2盒RoboSep™槍頭

分選試劑盒和富集試劑盒的主要區(qū)別:分選試劑盒是富集試劑盒的更新版,實(shí)驗(yàn)耗時(shí)更少。

 

EasySep Human T Cell Enrichment Kit 19051以及更多CAR-T免疫細(xì)胞治療GMP級(jí)產(chǎn)品華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司  :1500 1904 520。紅榮微再-客服: 2395557778  經(jīng)銷商專員

紅榮微再以“傳遞科學(xué)價(jià)值,服務(wù)科學(xué)研究”為宗旨,主營干細(xì)胞、醫(yī)療、細(xì)胞治療、器官再生四大板塊的產(chǎn)品。

 

 

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