Corning NK 細胞活化擴增套裝和競爭產(chǎn)品的比較

Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝支持NK細胞的快速擴增，NK細胞產(chǎn)量高（約8.6 萬億，擴增290倍），細胞殺傷力強（效應(yīng)細胞：靶細胞=5:1 下殺傷力77.9%），與競爭產(chǎn)品相比很有優(yōu)勢。

Corning NK 細胞活化擴增套裝可以用于NK細胞的大量擴增，并且具有高活力和高殺傷能力。Corning NK 細胞活化擴增套裝飽和預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶，KBM NK活化培養(yǎng)基，KBM NK活化添加劑和KBM NK擴增培養(yǎng)基。前三個特別設(shè)計用于NK活化，zui后一個KBM NK擴增培養(yǎng)基于NK細胞擴增。NK活化培養(yǎng)基和擴增培養(yǎng)基生產(chǎn)都是使用高質(zhì)量試劑和cGMP級的原料。培養(yǎng)基唯二所含培養(yǎng)基是注射級的血清白蛋白和重組人胰島素。

介紹

自然殺傷細胞（NK）是重要的免疫細胞，能識別并清除腫瘤和病毒感染。體外大量培養(yǎng)NK細胞，滿足過繼性免疫治療所需一向比較困難。據(jù)資料，現(xiàn)有的培養(yǎng)方法都是采用擴增培養(yǎng)基搭配細胞因子（IL-2，IL-7，IL-15）的方案，需要研究者自行優(yōu)化后使用。

Corning NK 細胞活化擴增套裝提供了NK 細胞活化擴增的全套材料和標準操作方法，所得NK細胞擴增能力強，活性和殺傷能力高。研究者無需優(yōu)化，而且使用步驟精簡。和競爭產(chǎn)品比較了NK細胞產(chǎn)量，活力和NK 細胞體外 陽性表達比率和殺傷能力。

鑒定方法

免疫表型

收獲細胞表面標記表達評估方法：CD3-CD56+陽性率。

100 μL PBS 加入 1 x 10⁶ 個細胞，CD3 FITC +CD56 PE抗體染色 20min，染色過程 室溫避光。孵育后，PBS 緩沖液清洗細胞，200 μL PBS 重懸，用于流式細胞分析。每個樣本收集1萬個events，再用histogram overlay subtraction method using BD Accuri C6 軟件。

CCK-8 細胞毒性檢測

 K-562 細胞作為靶細胞。1 x 10⁵ cells/mL的K-562 細胞和 5 x 10⁵ cells/mL的效應(yīng)細胞共培養(yǎng)（96孔培養(yǎng)板三份，終體積200 μL/孔），37°C 過夜。分析前，每孔添加20 μL細胞計數(shù)試劑（ Cell Counting Kit-8 solution ，CCK8, Sigma Cat. No. 96992）， 37°C ，5% CO2孵育1 h。數(shù)據(jù)讀?。篠pectraMax® M4 (Molecular Devices) multifunction microplate reader。

結(jié)果

圖1 使用不同品牌的NK擴增試劑盒比較細胞生長曲線和擴增能力。與競爭產(chǎn)品B，C相比，Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝擴增能力具有優(yōu)勢。

圖2 CCK-8 細胞殺傷活性檢測。NK細胞與K-562細胞共培養(yǎng)16 h后（效應(yīng)細胞：靶細胞=5:1 ），Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝培養(yǎng)的NK 細胞殺傷能力77.9%，比競爭產(chǎn)品B (54.1%) 和C(57.6%) 有優(yōu)勢。

圖3 流式細胞分析NK細胞表面標志物。使用CD3-CD56+陽性率評估收獲細胞中NK細胞占比。Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝占比83.0%，高于競爭產(chǎn)品B (67.6%)和C(6.4%)。

結(jié)論
Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝支持NK細胞的快速擴增，NK細胞產(chǎn)量高（約8.6 萬億，擴增290倍），細胞殺傷力強（效應(yīng)細胞：靶細胞=5:1 下殺傷力77.9%），與競爭產(chǎn)品相比很有優(yōu)勢。

Corning NK 細胞活化擴增套裝提供了NK 細胞活化擴增的全套材料和標準操作方法。無需優(yōu)化，而且使用步驟十分精簡。

原文：Zhu Xuejing, Liu Jian Corning Incorporated

Corning Life Sciences Asia Technology Center Shanghai 201206, China