1. 什么是轉(zhuǎn)鐵蛋白?
轉(zhuǎn)鐵蛋白的英文名為T(mén)ransferrin,簡(jiǎn)稱(chēng)TF,是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì),負(fù)責(zé)運(yùn)載由
消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵。
人類(lèi)轉(zhuǎn)鐵蛋白zui早在血清中發(fā)現(xiàn)由兩個(gè)結(jié)構(gòu)相似的分別位于 N-端和 C-端的球形結(jié)構(gòu)域組成,為單一糖蛋白肽鏈,共含678個(gè)氨基酸殘基,分子量約為80kD,等電點(diǎn)為 5.9。每個(gè)轉(zhuǎn)鐵蛋白分子能可逆性地結(jié)合兩個(gè)三價(jià)鐵離子(Fe3+)。
2. 無(wú)血清培養(yǎng)基為什么要添加轉(zhuǎn)鐵蛋白?
轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中具有非常重要的作用,具體包括:
1) 避免細(xì)胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生,防止細(xì)胞受到傷害
2) 維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖
3) 維持細(xì)胞內(nèi)的鐵平衡
3. 無(wú)血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)鐵蛋白應(yīng)該選擇什么級(jí)別的?
天然提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細(xì)胞治療的無(wú)血清培養(yǎng)基中時(shí),可能會(huì)將人或動(dòng)物的病原體(如瘋牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細(xì)胞而帶入人體,從而發(fā)生非預(yù)期的疾病。而來(lái)源于植物重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白則可*避免人或動(dòng)物病原體污染的可能性,因此更適合用于配制細(xì)胞治療用
的無(wú)血清培養(yǎng)基。
4. 什么是重組的人轉(zhuǎn)鐵蛋白?
重組的人轉(zhuǎn)鐵蛋白是利用基因工程技術(shù)讓人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因在宿主中表達(dá)。
5. 為什么是水稻來(lái)源的人轉(zhuǎn)鐵蛋白?
目前已經(jīng)利用大腸桿菌,酵母,動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)了人的重組轉(zhuǎn)鐵蛋白,但總體來(lái)說(shuō)蛋白產(chǎn)量低,生物活性差,不具備商業(yè)應(yīng)用價(jià)值。而動(dòng)植物表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有很好的生物活性,并且成本低,易規(guī)?;?。
6. BioGems的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白的活性?
BioGems重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白是活性相當(dāng)于人血清鐵飽和的轉(zhuǎn)鐵蛋白(holo transferrin)。
活性驗(yàn)證方法:在無(wú)血清添加培養(yǎng)基中通過(guò)與天然人轉(zhuǎn)鐵蛋白在雜交瘤細(xì)胞的抗體生產(chǎn)中比較來(lái)證實(shí)生物學(xué)活性。
參考文獻(xiàn):
1重組轉(zhuǎn)鐵蛋白的研究進(jìn)展 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.06.011
無(wú)血清培養(yǎng)基添加物
BioGems(PeproTech)重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白