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技術(shù)支持

關(guān)于細(xì)胞凍存你了解多少呢?
更新時(shí)間:2020-08-26   點(diǎn)擊次數(shù):3036次

背景介紹

   細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,減少細(xì)胞代謝,以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,起到了細(xì)胞保種的作用。

   連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細(xì)胞系終會(huì)發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染。
   已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源,更換細(xì)胞系成本高昂,而且耗費(fèi)時(shí)間。
   可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。

細(xì)胞凍存流程

凍存操作步驟:

1.用移液器吸走原培養(yǎng)基,加入適量PBS洗1-2遍;

2.加入適量胰酶,置于培養(yǎng)箱中消化;

3.待消化到位后加入適量血清或*培養(yǎng)基終止消化,800-1000rpm離心3-5min;

4.配制凍存液,待細(xì)胞離心后去上清,加入凍存液重懸,調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106~1×107 cells/mL,轉(zhuǎn)移到凍存管中;

5.將凍存管放入程序降溫盒中,-80度過(guò)夜,然后轉(zhuǎn)移到液氮中保存。

6.凍存細(xì)胞后應(yīng)取出一管復(fù)蘇,檢測(cè)細(xì)胞的存活率。理論上細(xì)胞可在液氮內(nèi)長(zhǎng)期保存,為穩(wěn)妥起見可在細(xì)胞凍存半年后復(fù)蘇培養(yǎng),觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,再繼續(xù)凍存。

細(xì)胞凍存產(chǎn)品

 

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