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血清儲存以及解凍注意事項

更新時間:2021-12-07瀏覽:9790次

需要長期保存的血清必須儲存于-20℃至-70℃低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過一個月。  
由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預(yù)留定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。  
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:  
1、-20℃至-70℃血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天;  
2、然后移入室溫或者可以置于37℃水浴中,不斷搖動待全部溶解后再分裝。  
注意:  
1、在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與血清成分均一,減少沉淀的發(fā)生;  
2、切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀;  
3、若一次無法用完一瓶,無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。  
1)血清化凍為什么是渾濁的?  
血清制備過程中會保留部分纖維蛋白原,化凍過程中纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,使血清中出現(xiàn)渾濁,絮狀物。這種情況不影響血清的功效。  
血清化凍過程中,在37℃水浴中放置時間過長,也會導(dǎo)致沉淀產(chǎn)生,沉淀物包含磷酸鈣結(jié)晶。沉淀物也不影響血清功效。  
去除方法:  
可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,將上清液加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。也可直接過濾血清以去除這些絮狀物。  
2)血清熱滅活(除非必須,一般不建議作此熱處理)  
血清為何要滅活?  
血清熱滅活是將血清置于56℃水浴至*解凍。可滅活其中補體系統(tǒng)中具有蛋白酶活性的成分。補體是免疫系統(tǒng)的成分。對于那些培養(yǎng)困難的細(xì)胞、用于病毒檢測的細(xì)胞、用于細(xì)胞毒性檢測很重要,可避免補體帶來的不利影響。單熱滅活也破壞血清中的生長因子,所以除非必需,血清才滅活處理。  
啟動的補體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清。  
血清滅活的正確方法  
(1)按照前面的介紹正確化凍;  
(2)水浴預(yù)熱56℃。水量要足夠,水深要超過瓶中血清的高度;  
(3)輕輕搖動已解凍的血清,置于水浴中,水位可能會下降;  
(4)待水溫重新到56℃時,再計時30分鐘;  
(5)從水浴中拿出血清,待冷卻。-20/-70℃存放。