人AB血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。
凝血收縮,其周?chē)龀鲋S色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。正常人AB血清來(lái)自于AB血型健康男性供體,該血清是由AB血漿經(jīng)去纖維蛋白得到的,所有供體病毒標(biāo)志物檢測(cè)為陰性。
下面讓我們來(lái)了解一下人AB血清的應(yīng)用有哪些吧
應(yīng)用一:
正常人AB血清用于DC細(xì)胞的體外培養(yǎng):用肝素抗凝管采集患者自體的外周血40-50ml,通過(guò)Ficoll-Hypaque密度梯度離心分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),PBMC在含5-10%滅活的正常人AB血清的l640培養(yǎng)基里培養(yǎng)30-90min,吸去懸浮細(xì)胞,貼壁細(xì)胞用含800-2000U/mlGM/CSF、500-1000U/mlIL-4、5%正常人AB血清的1640培養(yǎng)基中在6孔培養(yǎng)扳中培養(yǎng)5-7天??梢?jiàn)懸浮的有樹(shù)突形狀的成熟DC細(xì)胞。
應(yīng)用二:
正常人AB血清用于間充質(zhì)干細(xì)胞的制備和培養(yǎng):
a)使用無(wú)菌手動(dòng),或自動(dòng)方法處理臍帶或胎盤(pán)組織至小于1mm大小
b)進(jìn)一步可使用無(wú)菌組織研磨設(shè)施處理組織至更小的顆粒
c)室溫離心250g5分鐘,棄去上清,收集細(xì)胞,用DMEM清洗。再次離心和清洗。
d)常規(guī)膠原酶,胰蛋白酶處理組織。
e)常規(guī)收集儲(chǔ)存一代和培養(yǎng)后收集第二,三代間充質(zhì)干細(xì)胞。
f)培養(yǎng)采用Dulbecco’smodifiedeagle’smedium(DMEM,Gibco,USA),10%自身血清或正常人AB血清,1%glutamine(Gibco,USA)及無(wú)血清培養(yǎng)液。