血漿游離RNA保存管中含有一種防腐劑,它能穩(wěn)定有核血細(xì)胞,防止細(xì)胞RNA的釋放,是保護(hù)游離循環(huán)RNA的一種血液收集管,用于采集、運(yùn)輸和穩(wěn)定血液游離RNA。 還可加強(qiáng)對(duì)細(xì)胞RNA的純化、檢測(cè)和分析。管中的樣本在18°C-25°C能穩(wěn)定在7天,以便于樣本收集、傳輸和存儲(chǔ)。適用于臨床研究、藥物開(kāi)發(fā)和診斷分析發(fā)展。
血漿游離RNA保存管的使用方法:
1、用用標(biāo)準(zhǔn)靜脈穿刺技術(shù),采集血液到抗凝真空采血管。
2、采血管與血液RNA保存管連通,保存管中的負(fù)壓將自動(dòng)轉(zhuǎn)移2.5ml血液至血液RNA保存管。
3、下顛倒混勻保存管15-30次,或渦旋混勻至少30s,以保證血液與保存液充分混合。
用含抗凝劑的采血管進(jìn)行采血,不會(huì)影響下游的反應(yīng),如果沒(méi)有采血管,也可以自己添加抗凝劑,提前準(zhǔn)備0.04M的EDTA溶液,每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液,顛倒混勻即可。放置血液RNA保存管保存于-20℃至-80℃,一般2-3年內(nèi)均可以提取,保存時(shí)間越短,提取的質(zhì)量越高,在2個(gè)月內(nèi)提取。
注意事項(xiàng):
1.血液RNA需避光4℃保存;
2.血液轉(zhuǎn)移至保存管后,務(wù)必混合均勻,否則將影響保存效果;
3.保存管中液體對(duì)人體有刺激性,不能直接用于血液采集。
如果只是短期儲(chǔ)存,重懸的RNA應(yīng)放置于-20°C;如果是長(zhǎng)期儲(chǔ)存的話,就應(yīng)該放置于-80°C。盡管重懸于水或緩沖液中的RNA也可以儲(chǔ)存在-80°C,但保存血漿游離RNA保存管中的RNA沉淀則更加穩(wěn)定,可以長(zhǎng)期保存。我們推薦將RNA溶液分裝在幾支管中。這會(huì)避免反復(fù)凍融損傷RNA,并預(yù)防偶然的污染。
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