凍存管爆炸原因是因?yàn)橐旱獫B入凍存管內(nèi),當(dāng)把凍存管從液氮罐取出時(shí),液態(tài)氮揮發(fā),導(dǎo)致體積迅速膨脹而不能及時(shí)排出引起爆炸。 具體原因就是
1. 凍存管質(zhì)量差;
2.凍存管的蓋子沒(méi)擰緊,導(dǎo)致液氮進(jìn)入管內(nèi),當(dāng)從液氮罐取出后或者在水浴加熱復(fù)蘇時(shí),管內(nèi)液氮迅速氣化,體積急劇膨脹而發(fā)生爆炸。
二、 解決方案:
1.液氮罐的細(xì)胞留種用,平時(shí)常用細(xì)胞的放-80冰箱就行了,只要不融化,可以保存一年半載沒(méi)問(wèn)題,這就大大降低了從液氮取細(xì)胞的概率。
2. 凍存管。用進(jìn)口的凍存管;沒(méi)有的話就盡量使用內(nèi)旋的凍存管,這樣液氮?dú)饣瘯r(shí)相對(duì)于外旋的凍存管容易排出,不易爆炸;如果只有外旋的凍存管,那么取出后就盡快倒置凍存管或者水平放置數(shù)十秒,等液氮流出后再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞。
3. 凍存細(xì)胞時(shí)盡量加多一點(diǎn)凍存液,比如2ml凍存管加1.8ml凍存液,保留少量空間。
4. 凍存細(xì)胞時(shí)凍存管口盡量擰緊。
5. 封口膜的使用。其實(shí)封口膜在液氮中根本不起作用。液氮溫度極低,封口膜因此會(huì)變得很脆,不能阻止液氮進(jìn)入,而液氮更容易殘留在管壁和封口膜之間,更加危險(xiǎn)。有些人會(huì)用醫(yī)用白膠布在封口處纏一圈,會(huì)有一定的作用。
6. 復(fù)蘇前防護(hù):帶好帆布手套和實(shí)驗(yàn)防護(hù)眼鏡,準(zhǔn)備好鑷子(避免溫度高的手直接接觸凍存管給凍存管升溫,同時(shí)保護(hù)手凍傷或炸傷)。
7. 從液氮里取細(xì)胞的時(shí)候,先在液氮罐上面的蒸汽里放一會(huì),然后再拿出來(lái),將凍存盒殘余的液氮流到罐內(nèi),避免拿出時(shí)凍傷,也避免細(xì)胞從液氮迅速升到室溫發(fā)生爆炸。
8. 取出凍存管后:①可以先放-80℃冰箱,讓液氮揮發(fā)出來(lái)后,再?gòu)?fù)蘇;②或者先把管子從液氮中移到冰上,待液氮揮發(fā);③再或者先將凍存管平放在吸水紙或干毛巾上數(shù)十秒,待管內(nèi)液氮自然流出且揮發(fā)至沒(méi)有氣體冒出,再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞(凍存管直立起來(lái)后管內(nèi)液氮很難在短時(shí)間內(nèi)流出和揮發(fā)出,而放平以后,液氮會(huì)快速?gòu)墓芸p隙中滲漏出來(lái));④或者迅速將管子擰松口,幫助液氮快速出來(lái)。