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神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227

簡要描述:Neural Differentiation Medium神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227(Y40002)是一款成分確定、無血清、包含N2 & B27添加劑的*培養(yǎng)基,用于將單層貼壁生長的小鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)方向分化1。該款培養(yǎng)基上市時間超過10年,一共有超過47篇文獻使用。

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  • 更新時間:2023-09-15
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Neural Differentiation Medium神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227

Neural Differentiation Medium神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227(Y40002)是一款成分確定、無血清、包含N2 & B27添加劑的*培養(yǎng)基,用于將單層貼壁生長的小鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)方向分化1。該款培養(yǎng)基上市時間超過10年,一共有超過47篇文獻使用。

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CellArtis

Y40002

Neural Differentiation Medium: NDiff 227

神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227

500 mL


產(chǎn)品特征-Neural Differentiation Medium NDiff 227

成分確定、無血清的*培養(yǎng)基。

經(jīng)典配方,添加N2,B27。

只作用于小鼠細(xì)胞,有效促進小鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)方向分化。

添加其他因子后,可以維持人/小鼠干細(xì)胞培養(yǎng)。


圖一:分化培養(yǎng)中細(xì)胞形態(tài)變化

小鼠胚胎干細(xì)胞,在使用NDiff 227培養(yǎng)基單層貼壁培養(yǎng)后,分化為神經(jīng)細(xì)胞。

圖二:分化培養(yǎng)產(chǎn)物表達神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物Nestin和TUJ1



應(yīng)用-Neural Differentiation Medium NDiff 227

單層貼壁培養(yǎng)下小鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化。

單層貼壁條件下的胚胎干細(xì)胞維持培養(yǎng)。

文庫篩選化合物。

神經(jīng)分化的生物特性和功能性的研究與評價。


當(dāng)添加如Ying QL et al. (2003)文章中的添加劑,Neural Differentiation Medium NDiff 227可以支持小鼠胚胎干細(xì)胞無血清、無飼養(yǎng)層培養(yǎng)2。

Neural Differentiation Medium NDiff 227添加生長因子,可以用于成功培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞系3, 4。

當(dāng)添加FGF后,無血清的Neural Differentiation Medium NDiff 227培養(yǎng)基可以將小鼠胚胎干細(xì)胞分化為早期的定型內(nèi)胚層細(xì)胞(Anterior Definitive Endoderm,ADE)前體,該前體可以高效分化為肝臟細(xì)胞和胰腺細(xì)胞5


保存-Neural Differentiation Medium NDiff 227

-20℃保存,保質(zhì)期一年。融化后,4℃避光保存,4周內(nèi)使用。


使用方法-Neural Differentiation Medium NDiff 227

使用前準(zhǔn)備:培養(yǎng)基避光水浴解凍,*解凍前轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基防止被加熱,再接著柔力混合解凍全部培養(yǎng)基。也可以避光4℃解凍。如果出現(xiàn)沉淀,4℃過夜放置使沉淀*溶解。培養(yǎng)基有可見沉淀時不能使用,要確保使用前已經(jīng)*溶解。

單層貼壁培養(yǎng)下的小鼠胚胎干細(xì)胞神經(jīng)分化:

1.在明膠包被的塑料培養(yǎng)器皿中,添加NDiff 227培養(yǎng)基,接種早期傳代的胚胎干細(xì)胞,接種密度:2.5 - 10 x 103 cells/cm2。

2.每一兩天更換培養(yǎng)基。神經(jīng)分化早期預(yù)計會出現(xiàn)胚胎干細(xì)胞死亡造成的污染。

3.通過細(xì)胞形態(tài)和神經(jīng)元標(biāo)記物染色監(jiān)控神經(jīng)元分化。培養(yǎng)4-6天后,神經(jīng)分化表現(xiàn)明顯,7-9天后神經(jīng)元成熟。


歡迎您致電咨詢Neural Differentiation Medium NDiff 227 華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司  :152 1681 4001。華雅再生醫(yī)學(xué)-客服: 316 808 6348


背景知識

從胚胎干細(xì)胞或神經(jīng)干細(xì)胞直接分化成神經(jīng)細(xì)胞需要進行培養(yǎng)基優(yōu)化保證結(jié)果的可靠性。

Neural Differentiation Medium NDiff 227,神經(jīng)細(xì)胞分化的有效誘導(dǎo)培養(yǎng)基,通過使用傳統(tǒng)配方再添加N2和B-27,可以進行簡單高效的神經(jīng)分化。

1. 為什么研究“體外干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化"?

· 有一類病叫做神經(jīng)退行型疾病,常見的包括阿爾茨海默病、帕金森病。神經(jīng)退行性疾病的一個很顯著的現(xiàn)象就是腦細(xì)胞的消亡減少和腦細(xì)胞正常功能的喪失。

· 干細(xì)胞治療的概念在治療神經(jīng)退行性疾病的研究中有著很大的吸引力。生物醫(yī)學(xué)研究者的大概設(shè)想是,在體外(如細(xì)胞培養(yǎng)皿、細(xì)胞培養(yǎng)瓶)把干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成為神經(jīng)細(xì)胞,獲得這些從干細(xì)胞分化來的神經(jīng)細(xì)胞后,把他們重新注射回到病人的腦部。這些注射回去的干細(xì)胞替代那些病人原來的不正常的干細(xì)胞,從而使得病人的癥狀得到緩解。

· 體外能夠把干細(xì)胞誘導(dǎo)分化出神經(jīng)細(xì)胞是干細(xì)胞治療zui為基礎(chǔ)的步驟。在2003年前的這方面的研究中,有兩個條件被認(rèn)為二者必?fù)?jù)其一(只考慮貼壁培養(yǎng)干細(xì)胞的方式):*,認(rèn)為干細(xì)胞生長后形成好多細(xì)胞聚集在一起的(多層細(xì)胞)集落,是干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞方向分化的必要條件;第二,認(rèn)為與其他飼養(yǎng)層細(xì)胞共同培養(yǎng)是必須的(哺乳動物細(xì)胞貼壁培養(yǎng)時,使用飼養(yǎng)層細(xì)胞來支持或滋養(yǎng)干細(xì)胞生長)。但是按照這樣的條件,在培養(yǎng)中會造成一個很大的問題,即無法做到標(biāo)準(zhǔn)化地誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞。簡單地說,就是似乎是*同樣的實驗條件,但是分化誘導(dǎo)的結(jié)果大不相同。這樣,是無法將獲得的神經(jīng)細(xì)胞用于后續(xù)的回輸實驗的,因為兩次實驗回輸?shù)募?xì)胞在生理狀態(tài)上有明顯的差別。

· 因此,發(fā)現(xiàn)一個標(biāo)準(zhǔn)化的、少用外源因子(飼養(yǎng)層細(xì)胞是使用很多的外源因子)的方法,是“體外干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化"工作者必須解決的難題。


2. RHB-A和Neural Differentiation Medium NDiff 227培養(yǎng)基介紹

· 在2003年前,研究者發(fā)現(xiàn)在貼壁培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時,需要加入兩種因子去誘導(dǎo)干細(xì)胞分化成為神經(jīng)細(xì)胞,即N2和B27,其中Cellartis有N2添加劑。這兩種因子現(xiàn)在已經(jīng)成為神經(jīng)分化實驗中*的角色。

· 在2003年,蘇格蘭干細(xì)胞研究所的研究人員在Nature雜志上發(fā)表了一篇重要的研究報道,他們證明:

1)貼壁培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時,加入N2和B27后,超過半數(shù)的干細(xì)胞分化成為了神經(jīng)前體細(xì)胞;

2)這個實驗中,干細(xì)胞不形成聚落,單層生長。這個實驗中外源因子很少,高度可控。因此,這個實驗成為了體外誘導(dǎo)分化干細(xì)胞成為神經(jīng)細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)實驗方案。這個培養(yǎng)基,就是Cellartis的Neural Differentiation Medium NDiff 227培養(yǎng)基。(conversion of embryonic stem cells into neuroectodermal precursors in adherent monoculture)。

· 2008年,Cellartis在Ndiff227培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上做了改進,研發(fā)出RHB-A培養(yǎng)基。葡萄牙的研究團隊比較了Ndiff227和RHB-A兩種培養(yǎng)基,發(fā)現(xiàn)貼壁培養(yǎng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化神經(jīng)細(xì)胞的實驗中,使用RHB-A培養(yǎng)基,形成神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量比使用Ndiff227的情況多出10%以上。

· RHB-A和Ndiff227廣泛應(yīng)用于美國與歐州國家的科研實驗中,有多篇文獻可作為參考。



Neural Differentiation Medium NDiff 227僅供科研使用。


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