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名詞解釋：

NGS：高通量測序（High-Throughput Sequencing）又名下一代測序（Next Generation Sequencing，NGS），是相對于傳統(tǒng)的桑格測序（Sanger Sequencing）而言的。

荷蘭CleanNA核酸純化磁珠，NGS文庫/PCR產(chǎn)物

CleanNGS核酸純化磁珠與AMPureXP操作規(guī)程和結(jié)果無明顯差異，但價格更低。

CleanNGS磁珠可以通過調(diào)節(jié)磁珠和核酸樣本體積比，輕松進行核酸片段篩選。

CleanNGS核酸純化磁珠優(yōu)勢：

1. 優(yōu)異的緩沖體系，100bp以上擴增產(chǎn)物回收效率更高；

2. 有效去除dNTP、引物、引物二聚體、鹽離子和其他雜質(zhì)；

3. 可進行核酸大小篩選。

3. 磁珠磁含量更高，磁吸附時間更短；

4. 無RNA酶的生產(chǎn)過程確保能應(yīng)用于各種RNA的純化操作；

5. 可配套自動化設(shè)備進行高通量產(chǎn)物純化。

6. 與AMPureXP操作規(guī)程和結(jié)果無明顯差異，但價格更低。

CleanNGS核酸純化磁珠試劑盒使用羧化磁珠純化DNA、RNA，為新一代測序（NGS）流程提供了高效的純化系統(tǒng)。 CleanNGS試劑盒具有zui大的靈活性，只要調(diào)節(jié)樣品和CleanNGS磁珠的體積比，可以輕松進行核酸左側(cè)，右側(cè)或雙側(cè)大小篩選。

CleanNGS使DNA和/或RNA核酸片段根據(jù)其大小選擇性地結(jié)合到磁珠上，同時根據(jù)化學(xué)性質(zhì)去除鹽，引物，引物二聚體和dNTP。純化的DNA和RNA使用水或低鹽緩沖液洗脫磁珠，并且可以直接用于下游應(yīng)用等。CleanNGS可以手動使用，也可以適用于您當(dāng)前的液體處理工作站所用方法（例如Hamilton，Beckman，Agilent，Caliper，Perkin Elmer，Tecan和Eppendorf）。

應(yīng)用：

CleanNGS系統(tǒng)純化的產(chǎn)物是用水洗脫的，可立即用于下游應(yīng)用：

新一代測序、PCR

基因組DNA純化、RNA純化

片段分析、微陣列、限制性酶純化、克隆

CleanNGS DNA/RNA純化磁珠可配套的液體工作站：

Beckman FX, Beckman NX ，Hamilton Microlab Star，Hamilton StarLET，Xiril Neon Instruments，Caliper Sciclone，Thermo KingFisher BioSprint (Qiagen) Ambion MagMax 96，Perkin Elmer Janus，Agilent Bravo等。

工作原理：

羧化磁珠

羧化磁珠特異性結(jié)合，非特異性洗脫。相比硅基磁珠，非特異性結(jié)合更少，產(chǎn)量更高，更具有專有性。

試劑盒組份

CleanNGS羧基化磁珠，含于PCR結(jié)合緩沖液中

使用自備材料

•乙醇 •CleanNA環(huán)形磁鐵板 •用于DNA洗脫的TE或試劑級水

荷蘭CleanNA核酸純化磁珠，NGS文庫/PCR產(chǎn)物：CleanNA是歐洲

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操作流程：

PCR產(chǎn)物純化流程（上圖）

1 添加CleanNGS和Mix以將NGS文庫片段或PCR產(chǎn)物結(jié)合到磁珠上。

2 將磁珠磁化以將樣品與雜質(zhì)分離。吸出含雜質(zhì)溶液。

3 加入70％乙醇清洗磁珠。磁珠磁化。吸出乙醇。重復(fù)步驟。

4 加入水從磁珠上洗脫DNA。磁珠磁化并提取純化的PCR產(chǎn)物。

核酸片段篩選流程（上圖）

1.添加*份CleanNGS到文庫中以結(jié)合大片段

2.用磁鐵將磁珠從溶液中分離出來

3.將含有較小片段的上清液轉(zhuǎn)移到干凈的微孔中

4.添加第二份CleanNGS到上清液中以結(jié)合目標(biāo)大小片段

5.用磁鐵將磁珠從溶液中分離出來，吸出并丟棄含雜質(zhì)的上清液

6.用80％乙醇清洗珠子

7.加入水以從珠上洗脫DNA。使用磁鐵分離磁珠，并提取純化和經(jīng)過大小篩選的DNA核酸片段。

核酸片段篩選舉例：0.8x / 0.7x（左/右）片段篩選，樣品量50μL

•*步：

添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS

將大片段結(jié)合到磁珠上

結(jié)合和分離后轉(zhuǎn)移上清液

•第二步：

將（0.8-0.7）x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液

將感興趣的片段結(jié)合到新一組的磁珠上

吸出并棄上清液（含有zui小的片段）

清洗并洗脫經(jīng)片段篩選的DNA

*步：

添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS

將大片段結(jié)合到磁珠上

結(jié)合和分離后轉(zhuǎn)移上清液

第二步：

將（0.8-0.7）x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液

將感興趣的片段結(jié)合到新一組的磁珠上

吸出并棄上清液（含有zui小的片段）

清洗并洗脫經(jīng)大小片段篩選的DNA

訂購信息：

*基于10 µl PCR反應(yīng)量

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