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品牌 | illumina/美國因美納 | 貨號 | MS-102-3003 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品名稱:MiSeq Reagent Kit v3 (600 cycles)基因測序試劑盒
產(chǎn)品貨號:MS-102-3003
產(chǎn)品說明:
大輸出: 15 Gb(600個循環(huán)數(shù)),3.8 Gb(150個循環(huán)數(shù))
大Read: 多達(dá)2501萬
核酸類型: RNA, DNA
試劑類型: 雙端測序, 簇生成, 邊合成邊測序
技術(shù): 測序
系統(tǒng)兼容性:研究模式下的MiSeqDx, 研究模式下的MiSeq FGx, MiSeq, MiSeq
產(chǎn)品介紹:
MiSeq試劑盒v3的通量在所有MiSeq試劑盒中居*。這款v3試劑盒保留了與v1和v2試劑盒相同的即用型預(yù)裝試劑盒,通過改良試劑,可提高簇密度和片段長度,并提高質(zhì)量(Q)分值。
借助MiSeq試劑盒v3,研究人員可:
• 使單次運行的輸出翻倍
• 使用600次循環(huán)試劑盒,使片段長度長延伸至2 x 300堿基對
• 將片段數(shù)量增至2500萬個,以開創(chuàng)新的應(yīng)用
更新系統(tǒng)軟件后,可釋放v3試劑盒的全部功能
MiSeq v3試劑盒可使每個流動槽的輸出量翻倍。該試劑盒以600次循環(huán)格式提供,在任何Illumina測序系統(tǒng)上均可生成長片段長度。該試劑盒還提供150次循環(huán)格式,該格式支持計數(shù)應(yīng)用。此外,我們將繼續(xù)供應(yīng)所有MiSeq試劑盒v2配置。MiSeq試劑組件采用RFID編碼,并可巧妙地與MiSeq系統(tǒng)交互,以驗證與用戶定義的應(yīng)用之間的兼容性。
產(chǎn)品名稱:illumina MiSeq基因測序試劑盒v3 600循環(huán) 產(chǎn)品貨號:MS-102-3003
現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢
歡迎您的致電 400、 021 、2200 150、 2101 、 0459
illumina授權(quán)代理商:華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司
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illumina MS-102-3003 MiSeq Reagent Kit v3 (600 cycles)基因測序試劑盒
產(chǎn)品名稱:MiSeq Reagent Kit v3 (600 cycles)基因測序試劑盒
產(chǎn)品貨號:MS-102-3003
現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢
歡迎您的致電 400 、 021、 2200 150 、 2101 、 0459
illumina授權(quán)代理商:華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司
Illumina二代測序技術(shù),邊合成邊測序(SBS),是廣泛采用的新一代測序(NGS)技術(shù),負(fù)責(zé)產(chǎn)生世界上90%以上的測序數(shù)據(jù)。
Illumina的二代測序技術(shù)稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號收集、剪切等3個步驟。這3個步驟可以重復(fù),循環(huán)進(jìn)行。每循環(huán)一次測定一個堿基。想測定多少個堿基(即讀長),就循環(huán)多少次。測序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設(shè)定。到底測序多長合適,要根據(jù)項目性質(zhì)和需求來決定。大多數(shù)情況下,SR實驗(單端測序)測定1x50個堿基,PE實驗(雙端測序)測定2x150個堿基。
1 堿基延伸
Illumina測序試劑里所使用的dNTP特色,它們同時具有兩個修飾基團(tuán):一個熒光基團(tuán),一個可逆終止基團(tuán)。A、G、C、T 4種堿基分別標(biāo)記4種不同的熒光基團(tuán),它們在不同波長的激光激發(fā)下,能夠發(fā)射不同波長(即顏色)的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對應(yīng),因此根據(jù)激發(fā)光的波長可以識別堿基。4種堿基的終止基團(tuán)是一樣的。由于終止基團(tuán)的存在,所有dNTP每次都只能延伸1個堿基,無論給予多長的反應(yīng)時間。又由于該終止基團(tuán)是可逆的,在熒光信號收集完畢之后,可以用剪切劑切除該終止基團(tuán),使堿基恢復(fù)自然的可延伸狀態(tài),這時即可繼續(xù)進(jìn)行下一輪循環(huán),再測定一個堿基。
可逆終止基團(tuán)技術(shù)是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術(shù)一起,構(gòu)成了Illumina二代測序的兩大支柱,為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)打下了堅實的基礎(chǔ)。
2 信號采集
HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管,兩個濾色片。它們兩兩組合,可以形成4種不同的激發(fā)波長,正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。
Cluster上所標(biāo)記的熒光基團(tuán)在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號,可以用相機(jī)拍攝或者掃描的方式收集信號。掃描技術(shù)速度比較快,被X10系列采用。由于FC面積比較大,而且上表面和下表面要分別拍照,所以拍照過程相當(dāng)耗時。對于經(jīng)典的HiSeq 2000來說,一次測序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號,需要大約40分鐘的時間才能拍照收集完畢,時間比測序反應(yīng)本身還要長。
3 剪切
熒光信號收集完畢后,關(guān)閉激光,用剪切劑去除測序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標(biāo)記的熒光基團(tuán)和終止基團(tuán)。兩個修飾基團(tuán)均被切除,一方面消去干擾熒光,一方面使鏈末端的堿基回復(fù)到自然的可延伸狀態(tài),為下一輪測序做好準(zhǔn)備。
再重復(fù)合成、激發(fā)、收集等步驟,即可進(jìn)行第二個堿基的測序。
測序循環(huán)可以重復(fù)多次。理論上可以一直重復(fù),直到信噪比降低得無法有效識別堿基信號為止。由于熒光基團(tuán)的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減,Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減,所以實際上測序循環(huán)次數(shù)是有限的,大重復(fù)次數(shù)與sbs試劑的配方有關(guān)。測序的循環(huán)次數(shù)可以在軟件設(shè)置過程中人為,這個重復(fù)次數(shù)就是每個測序片段的讀長。目前,Illumina平臺的讀長有2x100 bp,2x125 bp,2x150 bp,2x300 bp等多種,其中2x150 bp用得廣泛。
單端測序:單端測序(Single-read)首先將DNA樣本進(jìn)行片段化處理形成200-500bp的片段,引物序列連接到DNA片段的一端,然后末端加上接頭,將片段固定在flow cell上生成DNA簇,上機(jī)測序單端讀取序列。