1、培養(yǎng)器皿的清洗 培養(yǎng)器皿清洗后不僅要求透明、無污跡,而且不能殘留任何物質(zhì)。某些化學(xué)物質(zhì)僅殘留百萬分之一毫克,就會對細胞產(chǎn)生毒性作用。因此清洗質(zhì)量的好壞直接影響到細胞培養(yǎng)成功與否,必須嚴格按照清洗的程序進行,以保證達到清洗的目的。一般玻璃器皿清洗的程序包括:浸泡、刷洗、浸酸和沖洗四個步驟。
(1) 浸泡
初次使用和培養(yǎng)用后的玻璃器皿都需先用清水浸泡,以使附著物軟化或溶解。新的玻璃器皿使用前應(yīng)先用自來水簡單刷洗,然后用5%稀鹽酸溶液浸泡過夜,以中和其中的堿性物質(zhì)。用過的玻璃器皿往往粘有大量蛋白質(zhì),干燥后不易刷洗掉,故用后立即浸入清水中刷洗。
(2) 刷洗
將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑(不用含沙粒的洗衣粉)水中,用軟毛刷反復(fù)刷洗,注意不留死角,洗后晾干備浸酸。
(3) 浸酸
刷洗不掉的微量雜質(zhì)經(jīng)過濃硫酸和重鉻酸鉀清潔液的強氧化作用后,可被除掉,而且對玻璃器皿無腐蝕作用,去污能力很強,是清洗過程中關(guān)鍵的一環(huán)。清潔液是由重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水按一定比例配制而成。浸泡時,器皿要充滿清潔液,勿留氣泡。浸泡時間不應(yīng)少于6小時,一般應(yīng)浸泡過夜。
(4)沖洗
刷洗和浸酸后都必須用水充分沖洗,使之不留任何殘跡。沖洗宜用洗滌裝置,亦可用手工操作,每瓶都得用水灌滿,倒掉,重復(fù)十五次以上,后再用蒸餾水漂洗2~3次,晾干備用。
2、橡膠制品的清洗 新購置的橡膠制品帶有大量滑石粉應(yīng)先用自來水沖洗干凈后,再作常規(guī)清洗處理。常規(guī)處理方法是:每次使用后的橡膠制品都要置入水中浸泡,以便集中處理和避免附著物干涸,然后用2%NaOH液煮沸10~20分鐘,以除掉培養(yǎng)中的蛋白質(zhì)。自來水沖洗后,再用1%稀鹽酸浸泡30分鐘,后用自來水和蒸餾水各沖洗2~3次,晾干備用。用過的膠塞的清洗方法基本同清洗玻璃器皿,但膠塞刷洗的重點部位是膠塞使用面,逐個刷洗。