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無血清凍存液的使用方法分享

更新時間:2019-02-19瀏覽:3449次

   無血清凍存液,通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存。

  那么下面我們就來分享一下無血清凍存液的使用方法,一起來看看吧。

  一、凍存液成分

  無血清細胞,無血清干細胞及MSC凍存液

  無血清凍存液的保存條件

  儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將100 ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

  二、無血清凍存液的使用方法

  選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率。

  1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。

  2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。

  (參考:5×105至5×106 cells/ml)。

  3.取相當(dāng)于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。

  4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。

  5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示*的冷凍保存管中。

  6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。

  7.若研究者需要液氮保存時,可將*凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。