產(chǎn)品名稱：BD Pharmingen IMag 磁珠細(xì)胞分離系統(tǒng)試劑Anti-Mouse CD4 Magnetic Particles - DM  (RUO)

產(chǎn)品貨號(hào)：551539

產(chǎn)品規(guī)格：

品牌

   BD IMag™

Clone

   GK1.5""

Alternative Name

   Cd4; CD4 antigen; L3T4; Ly-4; T-cell surface antigen T4/Leu-3

Isotype

   Rat LEW, also known as Lewis IgG2b, κ

反應(yīng)性

鼠 (QC Testing)  

應(yīng)用領(lǐng)域

   Cell separation (Routinely Tested)

免疫原

   Mouse CTL clone V4

Entrez Gene ID

   12504

Storage Buffer

   Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide.

監(jiān)管資質(zhì)級(jí)別

   RUO

產(chǎn)品介紹：

BD IMag™抗小鼠CD4顆粒是一種磁性納米顆粒，其表面結(jié)合有單克隆抗體。使用BD-IMag對(duì)這些顆粒進(jìn)行了優(yōu)化，以選擇或清除CD4攜帶的白細(xì)胞™ 電池分離磁鐵。據(jù)報(bào)道，CD4（L3T4）分化抗原在大多數(shù)胸腺細(xì)胞、成熟T淋巴細(xì)胞亞群（即MHCⅡ類限制性T細(xì)胞，包括大多數(shù)T輔助細(xì)胞）和NK-T細(xì)胞亞群中表達(dá)。此外，CD4在多能干細(xì)胞、骨髓和B淋巴細(xì)胞前體、胸腺內(nèi)淋巴細(xì)胞前體和脾臟樹突狀細(xì)胞亞群中也被檢測(cè)到。準(zhǔn)備和儲(chǔ)存

在4℃下未稀釋保存。通過親和層析從組織培養(yǎng)上清或腹水中純化單克隆抗體。在*條件下，將抗體或鏈霉親和素與磁性粒子結(jié)合，去除未結(jié)合的抗體/鏈霉親和素。

產(chǎn)品通知單

BD圖像™ 粒子由羧基功能化磁性粒子制備，該磁性粒子由Skold技術(shù)制造，并獲得美國(guó)轉(zhuǎn)利號(hào)7169618的許可。

注意：疊N化鈉在酸性條件下產(chǎn)生高毒性的疊氮酸。丟棄前，在自來水中稀釋疊氮化合物，以避免管道中積聚潛在爆炸性沉積物。

所有血清蛋白來源于美國(guó)農(nóng)業(yè)部檢測(cè)的位于美國(guó)的屠宰場(chǎng)。

白細(xì)胞被BD-IMag標(biāo)記™ 抗小鼠CD4顆粒-糖尿病根據(jù)磁標(biāo)記協(xié)議。這個(gè)標(biāo)記的細(xì)胞懸液隨后被放置在BD-IMag的磁場(chǎng)中™ 電池分離磁鐵（類別。第552311號(hào)）。有標(biāo)記的細(xì)胞移向磁鐵（正部分），使未標(biāo)記的細(xì)胞處于懸浮狀態(tài)，這樣它們就可以被吸出（負(fù)部分）。然后將管子從磁場(chǎng)中取出，使正的部分再懸浮。將分離重復(fù)兩次以提高正餾份的純度。磁選流程圖中給出了磁選步驟。在陽性組分被洗滌后，小尺寸的磁性顆粒允許陽性組分在下游應(yīng)用（如流式細(xì)胞術(shù)）中進(jìn)一步評(píng)估。

磁標(biāo)記協(xié)議

一。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室程序，從感興趣的淋巴組織制備單細(xì)胞懸液。將懸浮液通過一個(gè)70μm的尼龍濾器，去除細(xì)胞團(tuán)和/或碎片。

2。稀釋BD-IMag™ 緩沖器（10X）（類別。編號(hào)552362）1:10，用無菌蒸餾水或制備1X BD IMag™ 用0.5%牛血清白蛋白、2毫米乙二胺四乙酸和0.09%疊N化鈉補(bǔ)充磷酸鹽緩沖液。放在冰上。

盡管我們的經(jīng)驗(yàn)表明使用鼠標(biāo)BD Fc塊™ 純化抗小鼠CD16/CD32單抗2.4G2（貓。第553141/553142號(hào)）不是*細(xì)胞分離所必需的，一些實(shí)驗(yàn)室可能希望在他們的研究中使用它。

如果添加鼠標(biāo)BD Fc塊™，繼續(xù)執(zhí)行步驟3。如果不添加鼠標(biāo)BD Fc塊™，繼續(xù)執(zhí)行步驟4。

三。添加鼠標(biāo)BD Fc塊™ 在0.25μg/10e6細(xì)胞上，在冰上培養(yǎng)15分鐘。

四。用至少等體積的1X BD IMag清洗電池™ 緩沖液，仔細(xì)吸取所有上清液。

5個(gè)。旋轉(zhuǎn)BD IMag™ *抗小鼠CD4磁性顆粒-DM，每10e7個(gè)細(xì)胞添加50微升顆粒。

6。充分混合。在6℃-12℃下冷藏30分鐘。

7號(hào)。帶上BD IMag™-顆粒標(biāo)記體積高達(dá)1-8 x 10e7個(gè)細(xì)胞/毫升，帶有1個(gè)BD-IMag™ 緩沖，然后立即將試管放在電池分離磁鐵上。室溫下孵育6-8分鐘。

8個(gè)。將試管放在細(xì)胞分離磁鐵上，小心地吸出上清液。這個(gè)上清液含有負(fù)的部分。

9號(hào)。從電池分離磁鐵上取下管子，并添加1X BD IMag™ 緩沖到與步驟7相同的卷。輕輕地用移液管吸幾次細(xì)胞，然后將試管放回細(xì)胞分離磁鐵上再吸2-4分鐘。

10個(gè)。將試管放在細(xì)胞分離磁鐵上，小心地吸出上清液并丟棄。

11號(hào)。重復(fù)步驟9和10。

12歲。在后的清洗步驟之后，將陽性部分重新放入適當(dāng)?shù)木彌_液中，并以適當(dāng)?shù)臐舛冗M(jìn)行進(jìn)一步分析。

注意：避免非特異性標(biāo)記，快速工作并遵守建議的孵育時(shí)間。

產(chǎn)品名稱：BD品牌 磁珠細(xì)胞分離系統(tǒng)試劑 小鼠CD4抗體        產(chǎn)品貨號(hào)：551539

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